Otázka: Metody studia biopolymerů
Předmět: Biofyzika
Přidal(a): BobanCreed
– měření osmotického tlaku (difúzního koeficientu) => zjištění koncentrace (+ molekulové hmotnosti)
– měření viskozity => tvar molekuly
– rychlost sedimentace v centrifuze => průměr molekul
– elektronová transmisní mikroskopie => velikost, tvar
– chromatografie, elektroforéza => velikost
– optické metody
– rozptyl světla
– rozptyl je přímo úměrný 4.mocnině λ a 6.mocnině r molekuly (pro r<< λ) => velikost
– větší molekuly – závislost i na úhlu dopadu => tvar
– Ramanova spektrometrie
– při změnách struktury molekul je pohlcena či zvýšena část energie => změna λ
– měření λ => Ramanovy spektra => informace o změně struktury
– UV absorpční spektrofotometrie
– zvýšená absorpce UV záření některými zbytky AMK a NK – tzv. chromofory
– hypochromní efekt
– fotony interagují s dipólovým momentem vazeb
– uspořádané vazby (α,β-struktura) absorbují méně světla než neuspořádané
– měření optické aktivity
– polohy asymetrických uhlíků
– metody využívající elektromagnetické záření
– spektrofluorimetrie
– měření emise fluorescenčního záření po excitaci UV zářením
– fluorescence přirozená (tryptofan), nebo specificky navázaných látek
– závisí na chemickém okolí => informace o pozici látek ve struktuře
– NMR
– rentgenstrukturní analýza
– krystalická mřížka rozptyluje rentgen jako optická mřížka viditelné světlo
– snímání interferenčního obrazce na stínítku + počítačová analýza
– zjišťuje rozložení elektronů v podjednotkách krystalů
