Otázka: Analýza koloidů
Předmět: Biofyzika
Přidal(a): BobanCreed
Analýza koloidů
– oddělení disperzního podílu od prostředí
– chromatografie
– ultrafiltrace
– koloid je na membráně propustné jen pro rozpouštědlo, působí se na něj tlakem p>Π => reverzní osmóza
– dialýza
– dialyzační trubice propustná pro malé molekuly a ionty je umístěna do čistého rozpouštědla => difuze malých iontů
– centrifugace
– ultracentrifugy = až ve 100000min-1
– silové působení v centrifuze:
– vztlaková síla Fvz= ρVa = ρVrω2 a = odstředivé zrychlení
– odstředivá síla Fods=Vρ’rω2 ρ x ρ’ = prostředí x látka
– odpor v kapalině Fodp=6 π r η v η = koef. Stokesův vzorec v = rychlost pohybu částic vůči kapalině
– sedimentační koeficient: s = v/ω2r [s]
– [svedberg S] = 10-13s => koeficient menších bílkovin
– závisí na molekulové hmotnosti
– po centrifugaci je potřeba látku zviditelnit => UV spektrofotemtrie, interferenční metody
– elektroforéza
– pohyb elektricky nabitých částic v kapalině vlivem elektrického pole mezi anodou a katodou
– silové působení:
– elektrická síla FE = z.e.E E = intenzita el. pole
– odporová síla FODP = 6 π r η v
– rovnoměrný přímočarý pohyb => FE = FODP => z.e.E = 6 π r η v => v= zeE/6πrη
– elektroforetická pohyblivost u
u = v/E = ze/6πrη
– volná elektroforéza
– ve volném roztoku ve velké kyvetě
– volná kapilární elektroforéza
– v kapiláře
– elektroforéza na nosičích
– gely, acetylcelulózové fólie => možné rozstříhat a oddělit tak látky
– imunoelektroforéza
– látky rozdělené na základě srážení s protilátkami
– izoelektrická fokusace
– elektroforéza na gradientu pH => zastavení v místě izoelektrického bodu
– pro tvarově a chemicky podobné bílkoviny
